Behavioral effects of a low molecular weight peptide fraction from Phaseolus vulgaris in rats

Seminal studies stated that bean proteins are efficient neuronal tracers with affinity for brain tissue. A low molecular weight peptide fraction (<3kDa) from Phaseolus vulgaris (PV3) was previously reported to be antioxidant, non-cytotoxic, and capable of reducing reactive oxygen species and increasing nitric oxide in cells. We evaluated the effects of PV3 (5, 50, 100, 500, and 5000 µg/kg) on behavior and the molecular routes potentially involved. Acute and chronic PV3 treatments were performed before testing Wistar rats: i) in the elevated plus-maze (EPM) to assess the anxiolytic-like effect; ii) in the open field (OF) to evaluate locomotion and exploration; and iii) for depression-like behavior in forced swimming (FS). Catecholaminergic involvement was tested using the tyrosine hydroxylases (TH) enzyme inhibitor, α-methyl-DL-tyrosine (AMPT). Brain areas of chronically treated groups were dissected to assess: i) lipid peroxidation (LPO); ii) carbonylated proteins (CP); iii) superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) enzymatic activities. Neuronal nitric oxide synthases (nNOS) and argininosuccinate synthase (ASS) protein expression was evaluated by western blotting. Acute treatment with PV3 increased the frequency and time spent in the EPM open arms, suggesting anxiolysis. PV3 increased crossing episodes in the OF. These PV3 effects on anxiety and locomotion were absent in the chronically treated group. Acute and chronic PV3 treatments reduced the immobility time in the FS test, suggesting an antidepressant effect. TH inhibition by AMPT reverted acute PV3 effects. PV3 decreased LPO and CP levels and SOD and CAT activities, whereas nNOS and ASS were reduced in few brain areas. In conclusion, PV3 displayed central antioxidant actions that are concomitant to catecholaminergic-dependent anxiolytic and antidepressant effects.

Behavioral effects of Bj-PRO-7a, a proline-rich oligopeptide from Bothrops jararaca venom

The heptapeptide Bj-PRO-7a, isolated and identified from Bothrops jararaca (Bj) venom, produces antihypertensive and other cardiovascular effects that are independent on angiotensin converting enzyme inhibition, possibly relying on cholinergic muscarinic receptors subtype 1 (M1R). However, whether Bj-PRO-7a acts upon the central nervous system and modifies behavior is yet to be determined. Therefore, the aims of this study were: i) to assess the effects of acute administration of Bj-PRO-7a upon behavior; ii) to reveal mechanisms involved in the effects of Bj-PRO-7a upon locomotion/exploration, anxiety, and depression-like behaviors. For this purpose, adult male Wistar (WT, wild type) and spontaneous hypertensive rats (SHR) received intraperitoneal injections of vehicle (0.9% NaCl), diazepam (2 mg/kg), imipramine (15 mg/kg), Bj-PRO-7a (71, 213 or 426 nmol/kg), pirenzepine (852 nmol/kg), α-methyl-DL-tyrosine (200 mg/kg), or chlorpromazine (2 mg/kg), and underwent elevated plus maze, open field, and forced swimming tests. The heptapeptide promoted anxiolytic and antidepressant-like effects and increased locomotion/exploration. These effects of Bj-PRO-7a seem to be dependent on M1R activation and dopaminergic receptors and rely on catecholaminergic pathways.

Real-time PCR for detection of Brucella ovis and Histophilus somni in ovine urine and semen / PCR em tempo real para detecção de Brucella ovis e Histophilus somni em urina e sêmen ovino

A epididimite infecciosa ovina é uma das principais enfermidades reprodutivas de carneiros. O presente estudo teve por objetivo desenvolver protocolos de PCR em tempo real para B. ovis e H. somni e avaliar sua aplicabilidade em amostras de sêmen e urina de carneiros. Delinearam-se primers e sondas espécie-específicos para cada agente. As sondas foram delineadas com o sistema TaqMan incorporando um marcador FAM para B. ovis e Cy5 para H. somni na extremidade 5' e um quencher na extremidade 3'. A PCR em tempo real para B. ovis e H. somni foi altamente sensível, uma vez que a amplificação de DNA ocorreu com até 0,2ng de DNA/reação. A especificidade dos iniciadores e sondas foi avaliada com amostras de DNA de outros agentes causadores de epididimite ovina e nenhuma amplificação inespecífica foi observada. A aplicabilidade da técnica em amostras biológicas também foi confirmada, pois não houve perda de eficácia (P>0,05) quando comparada à PCR convencional com amostras de sêmen e urina de carneiros experimentalmente infectados.

Molecular characterization of neuropathogenic Equine Herpesvirus 1 Brazilian isolates / Caracterização molecular de isolados brasileiros de herpesvírus equino 1

Este trabalho descreve a caracterização molecular de oito amostras de herpesvírus equino 1 isoladas do sistema nervoso central de equinos que morreram com sinais neurológicos no estado de Minas Gerais. As amostras de EHV-1 foram isoladas em cultivo celular, e a caracterização molecular foi feita por genotipagem e identificação do marcador neuropatogênico por meio das técnicas de PCR, restrição enzimática e sequenciamento. A caracterização molecular desses isolados pode ser a base para o desenvolvimento de novas formulações vacinais com maior eficácia para a prevenção de doença neurológica causada pelo EHV-1.(AU)

Diagnóstico etiológico de enfermidades do sistema nervoso central de equinos no Estado de Minas Gerais, Brasil / Etiologic diagnosis of diseases of the central nervous system of horses in Minas Gerais State, Brazil

O Brasil possui o quarto maior rebanho equino do mundo, e o Estado de Minas Gerais detém o maior número de equinos do país. Portanto, um diagnóstico preciso das doenças neurológicas dos equinos é prioridade no estado. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi identificar, utilizando a Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), os agentes infecciosos responsáveis por enfermidades que afetam o sistema nervoso central (SNC) de equinos. De janeiro de 2009 a janeiro de 2011, foi realizado um levantamento dos casos de encefalites e encefalomielites em equinos no Estado de Minas Gerais, utilizando-se amostras de SNC de equinos que morreram com sinais neurológicos. Das 217 amostras de SNC, 47 (21,7%) foram positivas para o vírus da raiva pelo método de imunofluorescência indireta e inoculação em camundongos. Nas 170 amostras negativas para o vírus da raiva, o herpes-vírus equino-1 (EHV-1) foi diagnosticado em 20 (11,8%) e o herpes-vírus suíno-1 (SHV-1), em uma amostra por meio de PCR, e o vírus encefalite de Saint Louis (SLEV), em outra amostra, através de transcrição reversa (RT) e PCR (RT-PCR). Constatou-se que o vírus da raiva é o principal agente causador de encefalite em equinos, apesar do crescente número de casos de encefalomielite associados ao EHV-1 no Estado de Minas Gerais.(AU)

Brazil has the fourth largest equine herd in the world and the State of Minas Gerais has the largest equine population in the country. Therefore, an accurate diagnosis of cases of neurologic diseases is a priority in Minas Gerais. The aim of this study was to identify by Polymerase Chain Reaction (PCR) infectious agents associated with neurological disease in the central nervous system (CNS) of horses. A survey of encephalitis and encephalomyelitis in horses in Minas Gerais State was performed on samples of CNS from horses that died with neurological signs from January 2009 to January 2011. Forty seven CNS samples from 217 (21.7%) horses were positive for rabies virus by the indirect immunofluorescence assay and mouse inoculation. Among the 170 samples that were negative for rabies, EHV-1 was detected in 20 (11.8%) and the swine herpesvirus-1 (SHV-1) was detected in one sample by PCR, and the Saint Louis encephalitis virus (SLEV) was identified in another sample by reverse transcription (RT) and PCR (RT-PCR). Rabies virus is the most common causative agent of encephalitis in horses, despite the increasing number of cases of encephalitis associated with EHV-1 in the State of Minas Gerais.(AU)

Indirect ELISA for diagnosis of Brucella ovis infection in rams / ELISA indireto para diagnóstico da infecção por Brucella ovis em carneiros

Brucella ovis is a major cause of epididymitis in sexually mature rams, resulting in subfertility, infertility, and economic losses for the sheep industry worldwide. The aim of this study was to develop an indirect ELISA (iELISA) using recombinant proteins, namely rBoP59 and rBP26, as antigens for serological diagnosis of B. ovis infection. The BoP59 and BP26 recombinant proteins were expressed in E. coli and purified by affinity chromatography. Antigenicity was tested by Western blot and iELISA. Standardization of iELISA was performed with 500ng and 1µg BoP59 and rBP26 per well, testing serum from uninfected and experimentally infected rams. rBP26 was effective in distinguishing positive from negative rams. The rBP26 iELISA developed in this study is the first to use a completely purified rBP26 as antigen resulting in high sensitivity (100%) and specificity (90.2%), and an overall accuracy equal to 1.0...

Brucella ovis é uma das principais causas de epididimite em carneiros sexualmente maduros, resultando em subfertilidade e infertilidade e consequentes perdas econômicas para a ovinocultura em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi desenvolver ELISA indireto (ELISAi), utilizando como antígeno proteínas recombinantes BoP59r e BP26r para diagnóstico da infecção por B. ovis. BoP59r e BP26r foram expressas em E. coli e purificadas por cromatografia de afinidade e a antigenicidade testada por Western blot e ELISAi. A padronização do ELISAi foi realizada testando 500 ng e 1 µg de BoP59r e BP26r por poço e soros de carneiros infectados e não infectados. A BP26r foi eficiente em diferenciar ovinos negativos de positivos. O ELISAi com BP26 desenvolvido neste estudo foi o primeiro a utilizar BP26 completamente purificada como antígeno, resultando em elevada sensibilidade (100%) e sensibilidade (90,2%), com acurácia igual a 1,0...

Anti-ulcerogenic and antisecretory effects of Celtis iguanaea (Jacq. ) Sargent hexane leaf extract / Efeito anti-ulcerogênico e antisecretório do extrato hexânico das folhas de Celtis iguanaea (Jacq. ) Sargent

The Celtis iguanaea (Jacq.) Sargent (Cannabaceae) is one of the native species of the Cerrado region of Brazil widely used in folk medicine to treat dyspepsia. The objective of the present study was to evaluate the gastroprotective effect of the Celtis iguanaea (Jacq.) Sargent (HE) hexane leaf extract in the lesion and gastric secretion models.Antiulcerogenic activity of the Celtis iguanaea (HE) hexane leaf extract was observed with the experimental models, such as indomethacin and pyloric ligation-induced gastric ulcers. In order to evaluate the antisecretory activity of this extract, isolated Rana catesbeiana mucosa and pyloric ligation in mice were used. The HE treatment reduced the lesion index of indomethacin and pyloric ligation-induced ulcer. This extract also reduced the gastric acid secretion and total acidity (increasing the gastric pH) in mice. The secretion of H+ was reduced in the basal values (15.58 ± 1.99 µEq H+/g/15 min) when isolated Rana catesbeiana mucosa was incubated with HE. Intraduodenal administration of HE reduced the gastric secretion produced by bethanecol or histamine. The antiulcerogenic and antisecretory efficacy of HE in this study suggest anticholinergic and antihistaminergic mechanism or interruption of intracellular events that are linked to acid secretion.

Celtis iguanaea (Jacq.) Sargent (Cannabaceae) é uma das espécies nativas do cerrado brasileiro, sendo amplamente utilizada na medicina popular para o tratamento de dispepsia. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito gastroprotetor do extrato hexânico das folhas de Celtis iguanaea (Jacq.) Sargent (EH) em modelos de secreção e de lesões gástricas. A atividade antisecretória do extrato hexânico das folhas de Celtis iguanaea (EH) foi avaliada no modelo de mucosa isolada de Rana catesbeiana e pelo modelo de ligadura pilórica em camundongos. A avaliação da atividade anti-ulcerogênica do EH foi determinada no modelo de úlceras gástricas induzidas por indometacina e ligadura pilórica. Quando a mucosa de Rana catesbeiana isolada foi incubada com o EH, a secreção de H+ foi reduzida em comparação com o valor basal (15,58 ± 1,99 µEq H+/g/15 min). O tratamento com o EH reduziu o índice de lesões na úlcera induzida por indometacina e ligadura pilórica. O EH também reduziu o volume de secreção, a acidez total, e aumentou o pH gástrico. A administração intraduodenal reduziu a secreção gástrica produzida por betanecol ou histamina. A eficácia anti-ulcerogênica e antisecretória do EH neste estudo, sugere um mecanismo anticolinérgico e antihistaminérgico ou interrupção de eventos intracelulares que estão ligados à secreção ácida.

Estudo farmacognóstico de folhas e raízes da Spiranthera odoratissima A. St. -Hil. (Rutaceae) / Pharmacognostic study of the leaves and roots of Spiranthera odoratissima A. St. -Hil. (Rutaceae)

A Spiranthera odoratissima A. St.-Hil. (manacá) é um arbusto cujas raízes são utilizadas popularmente contra dores musculares, de estômago e de cabeça, disfunções hepáticas, reumatismo, e como estimulante do apetite. As folhas são empregadas como depurativo do sangue, nas afecções renais e hepáticas. O objetivo deste trabalho foi realizar o estudo morfo-anatômico de S. odoratissima, bem como a triagem fitoquímica, a determinação dos teores de água, cinzas totais e insolúveis em ácido. O material vegetal foi coletado em Leopoldo de Bulhões/ Goiás e os estudos morfo-anatômicos e a triagem fitoquímica foram realizados utilizando as técnicas convencionais. Verificou-se que a folha é hipoestomática, com estômatos anomocíticos e a epiderme apresenta papilas na face abaxial. O mesofilo é dorsiventral e a nervura principal possui drusas de oxalato de cálcio e cavidades secretoras. O pecíolo apresenta sistema vascular em forma circular. Na raiz, em crescimento primário, observou-se cilindro vascular com organização diarca. Na prospecção fitoquímica detectaram-se fenóis, taninos, cumarinas, flavonoides, triterpernos/esteróis, antraquinonas e antocianinas nas folhas e alcaloides, cumarinas, amido e saponinas nas raízes. Esses resultados são parâmetros importantes para o controle de qualidade dessa matéria-prima vegetal.

Spiranthera odoratissima A. St.-Hil. (manacá) is a shrub whose roots are popularly used against stomach pains, headache, muscle pain, liver disorders, rheumatism and as an appetite stimulant. The leaves are used as a blood depurative and for liver and kidney disease. The purpose of this work was to perform the morphological and anatomical study, the phytochemical screening and determine the water content and the levels of total and acid of S. odoratissima. The plant material was collected in Leopoldo de Bulhões/ Goiás and the morpho-anatomical studies and the phytochemical screening were performed using conventional techniques. It was verified that the leaf is hypostomatic, with anomocytic stomata and the epidermis has papillae on the abaxial surface. The mesophyll is dorsiventral and the midrib presents druses of calcium oxalate and secretory cavities. The petiole has a circular vascular system. The root in primary growth presents vascular cylinder with diarchic organization. Phenols, tannins, coumarins, flavonoids, triterpenes/sterols, anthraquinones and anthocyanins were detected in the phytochemical screening of the leaves, and alkaloids, coumarins, saponins and starch were detected in the roots. These results are important parameters for the quality control of the vegetal raw material.

Aspectos reprodutivos e produtivos de vacas da raça Holandesa com puerpério normal ou patológico / Reproductive and productive parameters of Holstein cows with normal or pathological puerperium

Foram avaliadas 103 vacas da raça Holandesa de primeira, segunda ou terceira ordens de lactação, com o objetivo de comparar aspectos reprodutivos e produtivos dos animais com puerpério normal ou patológico. Exames ginecológicos foram realizados semanalmente, do parto ao final do puerpério, por meio de palpação transretal, ultrassonografia e vaginoscopia. As incidências de partos gemelares, partos auxiliados, retenção de placenta e infecções uterinas até o primeiro serviço foram de 11,7%, 20,4%, 38,8% e 75%, respectivamente. A involução uterina e a primeira ovulação ocorreram aos 33,5±11,1 e 43,6±21,5 dias após o parto, respectivamente, com diferenças (P<0,001) entre vacas com ou sem infecção uterina. O primeiro serviço ocorreu aos 75,9±31,0 dias após o parto e a taxa de gestação foi de 20,7%. A produção de leite diária foi de 27,9±7,3 litros por vaca até 42 dias após o parto. O prejuízo com a redução na produtividade e o descarte do leite contaminado com resíduos de antibiótico foi equivalente a 598 litros de leite por vaca com retenção de placenta e infecção uterina. A alta incidência de transtornos puerperais interferiu na fertilidade e na produção de leite, causando elevado impacto econômico para a propriedade.

The study was performed with 103 Holstein cows of first, second or third orders of lactation, and aimed to compare reproductive and productive parameters of animals with normal or pathological puerperium. Uterine and ovarian examinations were performed weekly until 42 days after parturition, by rectal palpation, vaginoscopy and ultrasonography. The incidence of twin pregnancies, assisted births, retained placenta, and uterine infection until the first service, were 11.7%, 20.4%, 38.8% and 75%, respectively. Uterine involution and detection of the first corpus luteum occurred at 33.5±11.1 and 43.6±21.5 days after parturition, respectively, and differed (P<0.01) between cows with or without uterine infection. The first artificial insemination occurred in average at 75.9±31.0 days after parturition, and the pregnancy rate was 20.7%. Average daily milk yield was 27.9±7.3 liters/cow until 42 days after parturition. Financial losses related to decreased milk production and discarding of milk contaminated with antibiotic residues corresponded to 598 liters of milk/cow presenting retained placenta and uterine infection. The high incidence of puerperal diseases negatively affected the fertility and milk production, causing large economic impact to the milk production system.

Species-specific nested PCR as a diagnostic tool for Brucella ovis infection in rams / Nested PCR espécie-específica para o diagnóstico da infecção por Brucella ovis em carneiros

The aim of the present study was to evaluate a species-specific nested PCR based on a previously described species-specific PCR for detection of B. ovis in semen and urine samples of experimentally infected rams. The performance of the species-specific nested PCR was compared with the results of a genus-specific PCR. Fourteen rams were experimentally infected with the Brucella ovis REO 198 strain and samples of semen and urine were collected every week up to 180 days post infection. Out of 83 semen samples collected, 42 (50.6%) were positive for the species-specific nested PCR, and 23 (27.7%) were positive for the genus-specific PCR. Out of 75 urine samples, 49 (65.3%) were positive for the species-specific nested PCR, whereas 11 (14.6%) were genus-specific PCR positive. Species-specific nested PCR was significantly more sensitive (P<0.001) than the genus-specific PCR in semen and urine from experimentally infected rams. In conclusion, the species-specific nested PCR developed in this study may be used as a diagnostic tool for the detection of B. ovis in semen and urine samples from suspected rams.

O presente estudo objetivou avaliar uma técnica de nested PCR espécie-específica delineada a partir de PCR espécie-específica descrita anteriormente para detecção de B. ovis em sêmen e urina de carneiros infectados experimentalmente. O desempenho da nested PCR espécie-específica foi comparado com os resultados de uma PCR gênero-específica. Quatorze carneiros foram infectados experimentalmente com Brucella ovis REO 198 e amostras de sêmen e de urina foram colhidas semanalmente até 180 dias após a infecção. De 83 amostras de sêmen, 42 (50,6%) foram positivas pela nested PCR espécie-específica, e 23 (27,7%) foram positivas pela PCR gênero-específica. De 75 amostras de urina, 49 (65,3%) foram positivas pela nested PCR espécie-específica, enquanto 11 (14,6%) foram positivas em PCR gênero-específica. A técnica de nested PCR espécie-específica foi significativamente mais sensível (P<0,001) do que a PCR gênero-específica no sêmen e na urina de carneiros infectados experimentalmente. Em conclusão, a nested PCR espécie-específica desenvolvida neste estudo pode ser utilizada como ferramenta de diagnóstico para detecção de B. ovis em sêmen e urina de carneiros suspeitos.

Diagnosis of Brucella ovis infection by serology and PCR in urine samples from naturally infected rams in the state of Piauí / Diagnóstico da infecção por Brucella ovis por sorologia e reação em cadeia pela polimerase (PCR) em amostras de urina de carneiros naturalmente infectados no estado do Piauí

A brucelose ovina causada pela Brucella ovis é uma doença reprodutiva de carneiros caracterizada por epididimite, orquite, com consequente diminuição da fertilidade e prejuízos econômicos significativos. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a aplicabilidade da técnica de PCR como um método de diagnóstico em campo, comparado-a com a técnica de IDGA. Foram coletadas amostras de urina e soro de 90 carneiros oriundos de 31 rebanhos localizados no Estado do Piauí. Quatro das 31 (12,9%) propriedades avaliadas apresentaram animais positivos. Dezoito (20%) amostras de urina foram positivas pela PCR, enquanto o método de IDGA identificou 16 (17,8%) carneiros soropositivos. Embora os métodos tenham apresentado concordância baixa na estatística Kappa (k=0,04), não foi observada diferença estatística entre as técnicas (P>0,05) pelo teste exato de Fisher. A combinação dos dois testes aumentou significativamente a detecção de animais positivos para 34,4% (P <0,05), sugerindo que a associação de métodos de diagnóstico como a técnica de PCR em amostras de urina e sorologia por IDGA e a avaliação clínica dos animais é necessária para um diagnóstico eficiente na infecção por B. ovis.

PCR Multiplex para detecção dos principais herpesvírus neurológicos de ruminantes / Multiplex PCR for detection of Suid herpesvirus 1, Bovine herpesvirus 1, Bovine herpesvirus 5, Ovine herpesvirus 2

Desenvolveu-se uma PCR multiplex (mPCR) para diagnóstico diferencial de encefalite bovina causada por herpesvírus suíno 1 (SuHV-1), herpesvírus bovino 1 (BoHV-1), herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) e herpesvírus ovino 2 (OvHV-2). Os iniciadores foram projetados após alinhamento de sequências disponíveis no banco de genomas (GenBank) e a reação foi padronizada levando-se em consideração a concentração dos reagentes e os tipos diferentes de DNA polimerase. Após determinação da especificidade e sensibilidade, 65 amostras de encéfalo de bovinos com síndrome neurológica foram submetidas à análise. A sensibilidade analítica para detecção de BoHV-1, BoHV-5 e SuHV-1 foi, respectivamente, 10(1,2) TCID50/50µL, 10(1,0) TCID50/50µL, 10(1,3) TCID50/50µL na reação multiplex. Das 65 amostras analisadas, 10 foram positivas para BoHV-5, uma para BoHV-1 e cinco para OvHV-2. A mPCR descrita neste trabalho mostrou-se uma técnica útil para o diagnóstico diferencial de enfermidades relacionadas ao sistema nervoso central de bovinos.

The aim of this study was to develop a multiplex PCR (mPCR) for the differential diagnosis of bovine encephalitis caused by the suid herpesvirus 1 (SuHV-1), bovine herpesvirus 1 (BoHV-1), bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) and ovine herpesvirus 2 (OvHV -2). The primers were designed after alignment of sequences available in GenBank and the reaction was developed by taking into account the concentration of reagents and different types of DNA polymerase. After determining the specificity and sensitivity to PCR, 65 brain samples from cattle with neurological syndrome were submitted to the reaction. The analytical sensitivity for detection of BoHV-1, BoHV-5 and SuHV-1 was, respectively, 10(1,2) TCID50/50µL, 10(1,0) TCID50/50µL, 10(1,3) TCID50/50µL. Ten samples were positive for BoHV-5, one for BoHV-1, one for SuHV-1 and five for OvHV-2. The mPCR described here is a useful technique for the differential diagnosis of diseases related to the central nervous system of cattle.

Neurological disorder in cattle associated with bovine herpesvirus 4 / Desordem neurológica em bovinos associada ao herpevírus bovino 4

A nested PCR assay was used to diagnose bovine encephalitis through herpesviruses including bovine herpesvirus 5 (BHV-5), bovine herpesvirus 1 (BHV-1), Aujeszky's disease virus (SHV-1), and ovine herpesvirus 2 (OHV-2) in 14 fragments of central nervous system (CNS) from cattle that died with neurological signs. In addition, as some samples of bovine herpesvirus type 4 (BHV-4) have been isolated from neural tissue, it was also tested by nested PCR. The cases of encephalitis occurred in isolation at different times of the year and did not present any seasonality. The duration of the clinical course ranged between 1 to 15 days, and in 64.3 percent of the cases it manifested between 1 to 2 days. The most frequently observed neurological signs were ataxia, recumbency, unsteadiness and inability to stand, opisthotonus, paddling movements, nystagmus and ptyalism. In the nested assay, there was no evidence of: BHV-1, SHV-1 or OHV-2 in the DNA obtained from the CNS in any of the samples. But the presence of BHV-4 was found in all fragments of the CNS in cattle which died presenting neurological signs. Moreover, BHV-5 was found in association with BHV-4 in two of these samples.

Nested PCR foi utilizada para o diagnóstico de encefalite bovina por herpesvírus incluindo o herpesvírus bovino 5 (BHV-5), o herpesvírus bovino 1 (BHV-1), o vírus da doença de Aujeszky (SHV-1) e o herpesvírus ovino 2 (OHV-2) em 14 fragmentos do sistema nervoso central (SNC) de bovinos que morreram com sinais neurológicos. Embora o BHV-4 não seja reconhecido como vírus neurotrófico, foi detectado nos casos de encefalite que ocorreram isoladamente em diferentes épocas do ano e não apresentaram nenhuma sazonalidade. A duração do curso clínico variou entre 1 e 15 dias, e em 64,3 por cento dos casos manifestou-se entre 1 e 2 dias. Os sinais neurológicos mais freqüentemente observados foram ataxia, apatia, instabilidade, opistótono, movimentos de pedalagem, nistagmo e sialorréia. Nos ensaios de PCR nested realizados a partir do DNA obtido do SNC, não foi encontrado evidência de: BHV-1, SHV-1 ou OHV-2 em nenhuma das amostras. Mas, a presença de BHV-4 foi encontrada em todos os fragmentos do SNC de bovinos que morreram com sinais neurológicos. Além disso, o BHV-5 foi encontrado em associação com o BHV-4 em duas dessas amostras.

A comparison of two agar gel immunodiffusion methods and a complement fixation test for serologic diagnosis of Brucella ovis infection in experimentally infected rams / Comparação entre dois métodos de imunodifusão em gel de Agar e um método de fixação de complemento para o diagnóstico sorológico da infecção por Brucella ovis em carneiros experimentalmente infectados

A infecção por Brucella ovis é considerada uma das principais causas de epididimite e infertilidade em carneiros, resultando em falhas reprodutivas e perdas econômicas significativas em rebanhos ovinos ao redor do mundo. O estudo teve o objetivo de avaliar três testes sorológicos disponíveis para o diagnóstico da brucelose ovina por B. ovis, utilizando 181 soros ovinos. Amostras de soro provenientes de carneiros experimentalmente infectados foram coletadas ao longo de 192 dias pós-infecção (n=117) e durante o período pré-infecção (n=9). Adicionalmente, amostras de soro foram obtidas de ovinos provenientes de um rebanho livre para B. ovis (n=55). As técnicas de imunodifusão em gel de agar (IDGA), utilizando dois antígenos disponíveis comercialmente, e de fixação de complemento foram comparadas (FC). Foram obtidos resultados de sensibilidade especificidade semelhantes para ambos os métodos de IDGA e ainda, a técnica de IDGA foi mais eficiente do que a da FC para o diagnóstico sorológico da infecção por B. ovis.

Ocorrência do vírus da leucemia felina em Felis cattus em Belo Horizonte / Occurrence of feline leukemia virus in Felis cattus in Belo Horizonte

Blood samples from 1,072 domestic cats of nine administrative regions of Belo Horizonte, MG, were collected and tested using PCR nested for the occurrence of feline leukemia virus (FeLV). Overall occurrence was 47.5 percent (507/1072) being North (68.1 percent) and East (54.4 percent) the most prevalent areas. Epidemiological data showed that FeLV infection was very common among examined cats and breed neither gender nor were predisposing factors for FeLV. The results suggest that the agglomeration of a large number of cats in the same environment can be an important factor for the increase in the rate of transmission of this retrovirus among domestic cats in the studied city.

Conidiobolomicose em ovinos: reavaliação de três casos previamente diagnosticados como tumor etimoidal enzoótico / Conidiobolomycosis in sheep: reevaluation of three cases previously diagnosed as enzootic ethmoid tumor

Conidiobolomycosis is an infection caused by fungi of the genus Conidiobolus spp. that is associated with a granulomatous rhinitis in humans and animals. In sheep, the disease is clinically characterized by respiratory changes, exophthalmia, craniofacial asymmetry, and fever. Microscopically, there are multifocal granulomas containing intralesional hyphae. For a long time, this disease was diagnosed as Enzootic Ethmoid Tumor. This report described three cases of conidiobolomycosis that had been previously diagnosed as Enzootic Ethmoid Tumor. Samples of nasal cavity, lung, parotid gland, and lymph node from three sheep submitted to histopathological examination in 1979 were retrieved in 2010 for a new histological, histochemical, and immunohistochemical evaluations. Paraffin-embedded tissue sections were stained with Hematoxylin-Eosin, Grocott's Metanamine Silver, and Periodic Acid Schiff. Immunohistochemistry was performed on paraffin embedded tissues using anti-cytokeratin primary antibody. Based on histopathology, histochemistry, and immunohistochemistry, the diagnosis of conidiobolomycosis was confirmed in three sheep, which had been previously diagnosed as Enzootic Ethmoid Tumor in 1979.

Equine coital exanthema in a stallion / Herpesvirus equino 3 em um garanhão

Em agosto de 2008, um garanhão da raça Mangalarga Marchador, de quatro anos de idade, com histórico clínico de apatia, inapetência e edema de prepúcio e escroto, apresentou, ao exame clínico, exsudato purulento fluindo pelo óstio prepucial, prepúcio e mucosa peniana com inúmeras lesões circulares de bordos elevados e hiperêmicos, centro ulcerado recoberto por material amarelado de aspecto fibrinoso, com distribuição multifocal. Histologicamente, a mucosa peniana apresentou áreas de ulceração associadas a infiltrado inflamatório misto, com necrose multifocal e moderado acúmulo de fibrina, que se estendiam para o tecido conjuntivo adjacente. O diagnóstico morfológico foi de balanopostite ulcerativa fibrino-necrótica multifocal intensa, similar ao encontrado em casos de exantema coital equino (ECE), causado pelo herpesvírus equino 3 (EHV-3). Amostra de pele do prepúcio e sangue, colhido em EDTA, foram submetidos a ensaios de PCR específicos para EHV-3, observando-se a amplificação de um produto de tamanho esperado de 518pb. A detecção do EHV-3 foi confirmada por meio de seu sequenciamento, sendo a sequência de nucleotídeos depositada no GenBank sob o número GQ336877. As sequências de nucleotídeos e as de aminoácidos deduzidos apresentaram identidade de 99 por cento e 100 por cento, respectivamente, com a sequência de EHV-3 disponível no GenBank, número AF081188. Após 15 dias de tratamento, houve completa cicatrização das lesões, com despigmentação da pele, principalmente, no prepúcio e na bolsa escrotal. Com base nos achados clínicos, histopatológicos, PCR e sequenciamento, concluiu-se tratar de um caso de exantema coital equino, sendo o primeiro com confirmação definitiva do agente etiológico no Brasil.

Meningoencephalitis in a horse associated with equine herpesvirus 1 / Meningoencefalite em um cavalo associado com herpesvírus eqüino 1

Um garanhão da raça Brasileiro de Hipismo, de 12 anos de idade, apresentou um quadro neurológico complexo, que se assemelhava, em vários aspectos, aos sinais neurológicos causados pelo herpesvírus eqüino 1 (EHV-1), variando desde uma suave ataxia à completa paralisia dos posteriores. O animal morreu com menos de 12 horas após o início dos sinais nervosos. O diagnóstico de EHV-1 foi feito pela detecção do DNA viral no sistema nervoso central por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR) e posterior sequenciamento.

Utilização de parte da região codificadora da glicoproteína b na diferenciação do herpesvírus bovino 1.1, herpesvírus bovino 1.2 e herpesvírus bovino 5 / Utilization of part of the region which codes for glycoprotein b in bovine herpesvirus 1.1, bovine herpesvirus 1.2 and bovine herpesvirus 5

Utilizou-se uma reação em cadeia de polimerase (PCR) previamente desenvolvida para a amplificação de parte da região única longa 27 (UL27) do genoma de herpesvírus bovino 1.1 (BoHV-1), que codifica a glicoproteína B, buscando a diferenciação entre isolados de BoHV-1.1 e BoHV-5. Os produtos de PCR gerados a partir de isolados de BoHV-1.1 e BoHV-5 mostraram padrão de amplificação diferenciado em seus tamanhos moleculares. Analisando as seqüências de nucleotídeos dos produtos de PCR obtidos de dois isolados de BoHV-5, juntamente com as seqüências dos produtos de PCR obtidos de um isolado de BoHV-1.1 e de três isolados de BoHV-1.2, previamente depositados no GenBank, verificou-se que a diferença observada na amplificação se deve ao número de repetições de G-C presentes no final da região codificadora da gB, particularmente nas seqüências 5'-G(A/T)CC-3'. A análise dessas seqüências-motivo desponta como uma ferramenta auxiliar na diferenciação entre isolados de BoHV-1.1, BoHV-1.2 e BoHV-5.

Atividades analgésica e/ou antiinflamatória da fração aquosa do extrato etanólico das folhas da Spiranthera odoratissima A. St. Hillaire (manacá)

Os testes de contorção abdominal induzida por acido acético, de edema de orelha induzido por óleo de Croton e de peritonite induzida por carragenina foram usados para o estudo de atividades analgésicas e/ou antiinflamatórias da fração aquosa do extrato etanólico das folhas de Spiranthera odoratissima. A fração aquosa inibe o número de contorções abdominais, reduz o edema de orelha e a migração de leucócitos. Os resultados sugerem que as folhas de Spiranthera odoratissima contêm compostos com atividade antiinflamatória.

Acetic acid-induced abdominal writhing, croton oilinduced mice ear oedema test and carrageenan-induced peritonitis were used to study the analgesic and antiinflammatory activities of the aqueous fraction of the ethanolic extract from Spiranthera odoratissima leaves. It caused a dose dependent inhibition of acetic acid-induced abdominal writhing, reduction in ear oedema formation and leukocyte migration. The results suggest that Spiranthera odoratissima leaves contain compounds with antiinflammatory activity.